Напишите нам
Ваше сообщение отправлено!
Напишите нам
Закрыть

Расчет дня вакцинации цыплят против болезни Гамборо по формуле Девентер:какую тест-систему использовать?

Совет: «Если вы делаете это, делайте это хорошо» Жак де Вит

Новые подходы к контролю инфек­ционных заболеваний направле­ны на улучшение качества рабо­ты ветеринарной службы. Самый яркий пример — контроль болезни Гамборо, который уже в течение пяти послед­них лет на Украине осуществляется «не вслепую». Сегодня ветеринарный врач любого птицеводческого хозяйства для определения дня вакцинации против болезни Гамборо использует математи­ческий расчет по результатам серологи­ческого исследования, что значительно улучшило эпизоотическую ситуацию в стране.

В основе расчета сроков вакцинации лежат закономерности элиминации ма­теринских антител — равномерное сни­жение титра антител до нулевой отметки. Снижение уровня антител вдвое осу­ществляется за определенный период времени. Этот промежуток времени на­зывается периодом полураспада (ПП). Данная величина определена в лабора­торных условиях. Она зависит от уров­ня метаболизма и интенсивности роста птицы. Для несушек период полураспада составляет 5,5 дней, для родительского стада - 4,5, для бройлеров - 3,0-3,5 дней.

Таким образом, уровень материн­ских антител снижается вдвое (или на один log2) за один период полураспа­да. Зная эту закономерность, мы можем при помощи математической формулы рассчитать день, когда титр достигнет уровня, который не будет препятство­вать эффективному действию вакцины. Этот уровень материнских антител на­зывается целевым титром (ЦТ). Дан­ный показатель — постоянная величина, определяемая производителем вакцин. Целевой титр зависит от иммуногенно­сти — «силы» вакцины. Например, це­левой титр для средних вакцин — 125, а для средних плюс — 500 и т.д.

Чтобы рассчитать день вакцинации, врачу необходимо определить исход­ный титр материнских антител (ИТ) в первые дни жизни и знать возраст (В) птицы в момент взятия крови.

Четыре вышеперечисленные величи­ны исходный титр материнских анти­тел, период полураспада, целевой титр материнских антител, возраст птицы — величины, необходимые для введения в формулу Девентер, которая с 1990 года стала наиболее точной матема­тической формулой для расчета дня вак­цинации при однократной и двукратной схеме:

(Log 2 ИТ – Log 2 ЦТ) х ПП + В

ИТ – исходный титр материнских антител

ЦТ – целевой титр материнских антител

ПП – период полураспада

В – возраст птицы в момент взятия крови.

Как на практике осуществляют расчет сроков вакцинации

Прежде, чем вплотную подойти к этому вопросу, следует отметить неко­торые рекомендации от разработчика форму-лы, которые существенно влия­ют на качество конечного результата (1).

1. Известно, что для расчета дня вакци­нации следует отбирать сыворотки от репрезентабельного количества цыплят (не менее 18) из разных мест птичника методом «конверта». Цы­плята должны быть первоклассного качества. От слабых или обезвожен­ных особей отбирать сыворотки не следует, поскольку они не есть типич­ными представителями стада.

2. Возраст цыплят в момент отбора крови может варьировать от 1 до 10 дней. Эти сроки можно привязывать к схеме вакцинации родительского стада. Если родительское стадо не вакцинировано инактивированной вакциной или вы не имеете информа­цию о схеме вакцинации родителей, отбор крови следует произвести на 1-4-й день. В случае использования инактивированной вакцины для пти­цы родительского стада, отбор сыво­ротки крови у цыплят может быть на 4-7-й день.

3. Результаты расчета дня вакцинации зависят от тест-системы, на которой определяется исходный титр материнских антител. Следует акцентиро­вать внимание на том, что формула Девентер разработана исключитель­но для использования тест-систем фирмы IDEXX (1). Данная тест-система была выбрана разработчиком из до­ступных коммерческих тест-систем по ряду объективных причин. При помощи тест-системы IDEXX были определены постоянные величины, используемые в формуле (период полураспада, целевой титр материн­ских антител). Достоверность этих параметров была подтверждена в реакции нейтрализации. Посколь­ку формула Девентер адаптирована только для IDEXX тест-системы, то ис­пользование других тест-систем не рекомендовано без предваритель­ных научных исследований и сравне­ния полученных результатов с «золо­тым стандартом» (1).

Тактику расчета дня вакцинации мож­но рассмотреть на примере.

Пример. Определение сроков вхож­дения с вакциной проводили для четы­рехдневных цыплят кросса Хай Лайн (коммерческое стадо). Учитывая эпизо­отическую ситуацию в хозяйстве, было принято решение проводить вакцина­цию средней плюс вакциной.

1-й этап: определение константных величин, которые будут использова­ны в формуле Девентер.

Информация об исследованном ста­де и об используемой вакцине дает нам три показателя, которые можно вводить в формулу:

ПП= 5,5 (период полураспада для коммерческой несушки);

ЦТ=500 (целевой титр материнских антител для средней плюс вакцины);

В= 4 (возраст птицы во время взятия крови)

2-й этап: определение исходного титра материнских антител (ИТ).

Исходный титр можно определить, исследуя сыворотки крови цыплят в иммуноферментном анализе. В нашем случае врач хозяйства направил сыво­ротки крови от одного стада в две раз­ные лаборатории, где было проведено исследование с использованием двух доступных тест-систем IDEXX и BioСhek. Результаты этих исследований можно увидеть на Гистограмме 1.

3-й этап: оценка гистограммы.

Внешний вид и структура гистограм­мы необходимы для определения, по меньшей мере, двух параметров: крат­ности вакцинации и процента охвата птицы вакцинацией.

Кратность вакцинаций зависит от однородности уровня антител (%CV). Если %CV ниже 35%, уровень считается однородным, и это дает основание для проведения одной вакцинации. Если %CV выше 40% — рекомендуют проводить 2, а иногда и 3 вакцинации.

После установления кратности при­менения вакцины определяют, какой % стада должен быть охвачен первой вак­цинацией и при необходимости – вто­рой. Генеральный подход при определе­нии процента охвата птицы вакцинацией следующий: однократную вакцинацию проводят, когда 70-80% стада достигает целевого титра (ЦТ). При двукратной схе­ме вакцинации первое вхождение с вак­циной осуществляют, когда 10–30% стада имеют целевой титр, второе – когда 75- 100% достигают его.

В нашем примере результаты, полу­ченные на разных тест-системах, были диаметрально противоположными. Результаты с использованием IDEXX тест-системы, указывали на проведение однократной вакцинации (%СV=9,1). Результаты, полученные на BioСhek, свидетельствовали о необходимости проведения двух вакцинаций (%СV=47). Такие результаты провоцируют появле­ние справедливого вопроса: «Какая ги­стограмма отражает реальную ситуацию в стаде? Каким результатам верить?»

4-й этап: определение сроков вак­цинации для разных групп птицы из исследуемого стада.

Для лучшей наглядности все титры, полученные в ходе исследования, следу­ет расположить в порядке возрастания от минимального до максимального, за­тем каждый исходный титр выразить в виде его логарифма с основанием 2 (log2 ИТ) (1). Имея все необходимые данные, теперь можно рассчитать день вхожде­ния с вакциной для каждой группы (сы­воротки крови), используя вышеуказан­ную формулу.

В предлагаемом вашему вниманию примере оказалось, что отличался не только внешний вид гистограмм. Ис­ходный титр (ключевой параметр фор­мулы Девентер) в разных тест-системах был разный: при использовании тест- системы фирмы BioСhek он превышал в 2-4 раза аналогичный показатель, полу­ченный на тест-системе IDEXX (cм. Табли­цу 1)2. Поскольку в разных тест-системах были получены разные исходные титры, а формула расчета сроков вакцинации — одна, то и расчетный день вакцинации принципиально отличался.

2 В статье использованы реальные данные исследования одних и тех же сывороток крови от 4-х дневных цыплят кросса. Хай Лайн. Из 20 предоставленных сывороток 18 были исследованы при помощи тест-системы фирмы IDEXX, 14 из них — при помощи тест-системы фирмы BioСhek.

Результат

По результатам, полученным с ис­пользованием IDEXX тест-системы, 75% стада достигнут целевого титра к 23-му дню жизни. Расчетный срок вакцина­ции — 23-й день жизни.

По результатам BioСhek 20% стада до­стигнет целевого титра к 26-му дню жизни, 90% стада достигнет целевого титра к 33- му дню. Расчетные сроки вакцинации:

  • первая вакцинация на 26-й день,
  • вторая вакцинация на 33-й день.

Какой результат отражает реальную картину? Ответ на этот вопрос дал автор формулы Девентер Жак де Вит в своей мо­нографии о расчете оптимального срока вакцинации против болезни Гамборо.

Все постоянные величины формулы Девентер (период полураспада, целе­вой титр) получены в ходе исследова­ния на тест-системе IDEXX. Логично, что и переменный показатель формулы, исход­ный титр, следует определять в той же тест-системе.

IDEXX и BioСhek не являются анало­гами и механическое перенесение пара­метров, подходящих только для IDEXX, может быть чревато непоправимыми по­следствиями. Хозяйство рискует, вводя в формулу заведомо завышенные или за­ниженные данные. То, что титры в реак­ции на BioСhek тест-системе выше, чем на IDEXX, неоднократно публиковалось (2) и подтверждалось в международных круго­вых испытаниях (www.animalhealthservise. nl). Завышенные титры обрекают на затя­гивание сроков проведения вакцинации. Так, по результатам IDEXX к 23-му дню жиз­ни птица практически всего стада готова к вакцинации, тогда как по результатам BioСhek к 26-му дню только 20–30% птицы готовы «принять» вакцину и только к 31– 33-му дню все стадо будет иметь целевой титр. Нет гарантии, что при поздних сро­ках вхождения с вакциной полевой вирус не инфицирует стадо.

Регулярные несвоевременные вакци­нации могут приводить к постоянному контакту стада с полевым вирусом. Не исключено, что следствием постоянной циркуляции возбудителя станет усиление его вирулентности.

Если вы, рассчитывая день вакцина­ции, не можете решить проблему Гамбо­ро, выясните в лаборатории, которая васобслуживает, какую тест-систему она ис­пользует.

Расчет дня вакцинации — это изо­бретение, которое призвано облегчить жизнь ветврача, оптимизируя сроки вхождения с вакциной надежным объ­ективным способом. Но надежным он есть только в том виде, в каком его предложил разработчик. Все непро­веренные вариации на эту тему разра­ботчик рекомендует избегать. Риск не оправдан.

Литература

1. Wit, J.J. Gumboro disease: estimation of optimal time of vaccination by the Deventer formula. Polish Veterinary Journal, 3, 19–22, 1998

2. Wit, J.J., Heijmans, J.F. Mekkes D.R. & Loon A.A.W.M. Validation of five commercially available ELISAs for the detection of antibodies against infection bursal disease virus (serotype 1), Avian Pathology, 30, 543–549, 2001.

Телефон для контактов: ООО «Центр ветеринарной диагностики» тел.: +38 (050) 536-23-51

Ирина Собко
Ирина Собко
Директор ООО "Центр Ветеринарной Диагностики"